隨着肥胖的增加，全球範圍內在因子膽固醇過度累積而患上非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）的患者數量不斷在增加,部分NAFLD會隊形變換爲以發炎和纖維化爲主要特徵的非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis，NASH）。日本也是如此，隨着生活方式的西化，體檢診斷出NAFLD的患病率爲9～30%，其中約10%被推定爲NASH。10～20%的NASH患者會出現肝硬化和肝癌。然而，由於導致NASH形成的因素尚未完全闡明，因此除了飲食和運動療法外，尚無有效的冶癒方法。
京都大學研究生院醫學研究科循環器内科的尾野亙教授、堀江貴裕助教在對miRNA進行泛函分析的程序中發現，肝細胞的miRNA-33b（miR-33b）在NASH形成中發揮着重要作用。此外，還發現透過投餵獨特性抑制33b的合成核酸，可以抑制NASH小鼠模式的發炎、纖維化和肝傷害，表明這種核酸藥物可用於冶癒NASH。尾野教授表示：「今後將繼續操作開發以應用於實際冶癒」。該研究成果已發表在《Life Science Alliance》上。
圖1 肝細胞和肝星狀細胞中miR-33b的表達高於miR-33a，透過投餵anti-miR-33b，肝細胞及肝星狀細胞的ABCA1表達擧升，且透過減量這些細胞内遊離膽固醇和肝内膽固醇結晶，減輕了肝臟發炎反應和纖維化。因此，肝細胞和肝星狀細胞中的miR-33b對於NASH發病具有重要作用，抑制miR-33b有望成爲新的NASH冶癒方法。（供圖：京都大學）
研究團隊此前已明確，小鼠的miRNA-33可抑制細胞内膽固醇轉運蛋白ABCA1的表達。ABCA1將膽固醇從細胞内運送到細胞外，形成好膽固醇。因此，激活miRNA-33會抑制ABCA1並降低好膽固醇。實際也已應答缺失miRNA-33的小鼠的動脈硬化和主動脈瘤的形成受到了抑制。
小鼠活體內的miRNA-33只有1種，而人活體內則有2種，爲此將與小鼠位於同一位置的命名爲a，另一個命名爲b。33b的作用尚不明確。
研究團隊製作了人源化基因敲入小鼠，並在與人類相同的位置插入了33b。這種小鼠中，33a和33b均有表達，且與野生型相比，動脈硬化加劇。
對小鼠肝臟的整體脂質分析表明，表達33a的小鼠脂質較多，而同時表達33a和33b的基因敲入小鼠具的脂質更多。
當給基因敲入小鼠投餵高脂肪食物後發現，脂肪在肝臟中累積，並伴有發炎和纖維化，以及表現出NASH病徵。此外，肝臟中的膽固醇和甘油三酯過度累積。相反，使肝細胞獨特性缺失33b後，NASH表達型得到改善，而使巨噬細胞獨特性缺乏33b也沒有改善表達型。堀江助教表示：「我們發現，給基因敲入小鼠投餵高脂肪飲食可使其成爲NASH模式小鼠。」
接着，研究人員在生物體中製備了能單獨抑制33a/b的人工核酸，連續12周投餵NASH誘發食物，同時每2周1次向基因敲入小鼠皮下注射抑制33a的人工核酸、抑制33b的人工核酸，及抑制33a/b的人工核酸。
在21周齡時應答給藥效果後發現，在對照組中觀察到小鼠肝臟中膽固醇累積，發炎細胞浸潤，細胞介素增加，肝星狀細胞活化和纖維化進展，而與此相對照，皮下注射人工核酸的小鼠膽固醇累積受到抑制。特別是，對肝臟中高表達的33b顯示出明顯抑制效果，甚至與同時抑制a和b的情況相比，對發炎細胞介素和纖維化基因的抑制更多。
堀江助教表示：「透過此次的實驗，我們發現人源化miR-33b基因敲入小鼠表現出NASH，其中肝細胞的miR-33b尤爲重要。」
原文：《科學新聞》
翻譯：JST客觀日本編輯部
【論文資訊】
雜誌：Life Science Alliance
論文：Inhibition of microRNA-33b in humanized mice ameliorates nonalcoholic steatohepatitis
DOI: 10.26508/lsa.202301902
